苹果SSR-PCR反应体系的建立与优化

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【作者】刘琳，孙晓帅，李乾，范书臣，时鸿迪，马钧，刘丹丹
【作者单位】云南大学农学院；西藏大学理学院；云南省农业科学院园艺作物所
【年份】2021
【卷号】37 第1期
【页码】61-66
【ISSN】1000-6850
【关键词】苹果 SSR-PCR最佳反应体系正交设计试验种质资源单因素试验
【摘要】为建立苹果属植物SSR-PCR反应优化体系,采用L16正交实验和退火温度梯度实验,分析反应体系中使用的模板、引物、Mg2+、dNTPs以及Top Taq酶浓度对扩增产物的影响,并对这5个因素进行4个水平不同浓度梯度的筛选和优化。结果表明,引物浓度对SSR-PCR反应体系的影响最大,通过综合分析最终确定SSR-PCR的25μL最佳反应体系为:30～60 ng DNA模板,1.2μL正反向引物,0.5μL dNTPs,0.5μL Top Taq酶以及2.5μL 10×Top Taq buffer。利...
【基金】国家自然科学基金;云南省科技计划项目
【文献类型】期刊