Geobacillus sp.GXS1α-淀粉酶基因的克隆表达及酶学性质研究

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【作者】薛蓓，裴建新，刘振东，罗章，韦宇拓
【作者单位】西藏大学农牧学院；广西南宁市疾病预防控制中心；广西大学微生物及植物遗传工程教育部重点实验室
【年份】2014
【卷号】第11期
【页码】1-5
【ISSN】1005-6521
【关键词】α-淀粉酶基因表达纯化地芽孢杆菌
【摘要】以地芽孢杆菌Geobacillussp.GXS1基因组DNA为模板,PCR扩增获得α-淀粉酶基因,构建重组质粒pSE-amy,转化大肠杆菌诱导表达。SDS-PAGE电泳结果显示,有相对分子质量为58ku的特异性蛋白得到表达。用金属镍亲和层析将重组蛋白进行分离纯化,并进行酶学性质研究。结果表明:重组酶的最适温度为65℃,最适pH7.0,Km值为2.93mg/mL,比活力为353.95U/mg,Tm为75℃。金属离子Cu2+、Fe3+、Fe2+、Zn2+、Co2+、Hg2+、Ag+及金属鏊合剂EDT...
【文献类型】期刊